Para construir uma biblioteca de DNA, utiliza-se...

Questão

Para construir uma biblioteca de DNA, utiliza-se técnicas de clivagem com enzimas de restrição e clonagem em vetor.

Com base nas etapas para construção de uma biblioteca de DNA, ordene os itens a seguir:

I — Fragmentos de DNA são inseridos em vetores idênticos e ligados através da DNA ligase.

II — Clivagem do DNA com uma enzima de restrição, formando centenas a milhares de fragmentos de DNA.

III — Inserção do vetor em células hospedeiras, produzindo a clonagem dos diferentes fragmentos.

IV — Extrair e isolar o DNA genômico de uma célula, tecido ou até mesmo de um organismo.

Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA:

Resposta certa

A) IV – II – I – III.

B) IV – I – II – III.

C) I – III – II – IV.

D) I – IV – III – II.

E) I – II – III – IV.

Para montar uma biblioteca genômica, a sequência lógica das etapas é:

Primeiro é necessário obter o material genético: extrair e isolar o DNA genômico do organismo/tecido/células (IV).
Depois esse DNA total é clivado por enzimas de restrição, gerando muitos fragmentos de tamanhos variados (II).
Em seguida, os fragmentos gerados são inseridos em vetores idênticos (previamente cortados de forma compatível) e unidos pela DNA ligase, formando moléculas recombinantes (I).
Por fim, os vetores recombinantes são introduzidos em células hospedeiras (transformação/transfecção), que irão se multiplicar e clonar cada fragmento inserido (III).

Logo, a ordem correta é IV → II → I → III.