A reação em cadeia de polimerase (PCR) permite que uma sequência de DNA seja muitas vezes amplificada. Para que a reação ocorra, é necessária a utilização de reagentes, como: DNA; Taq polimerase; íons magnésio, que funcionam como cofator para a Taq; nucleotídeos livres (adenina, timina, guanina e citosina), que serão incorporados nas sequências a serem polimerizadas; além de pequenos pedaços de DNA, chamados de iniciadores (primers), que são complementares (pareamento de bases) a determinada sequência do DNA. Com relação ao termociclador, assinale a alternativa INCORRETA:

Na PCR, o termociclador executa repetidamente ciclos de variação de temperatura que permitem a amplificação do DNA de forma exponencial (progressão geométrica).

Análise das alternativas:

A) Correta. A etapa de desnaturação (~$95\,^{\circ}C$) rompe as pontes de hidrogênio entre as bases, separando as duas fitas. Em seguida, ao reduzir para cerca de $55$–$60\,^{\circ}C$, ocorre o anelamento (hibridização) dos primers às sequências complementares.

B) Incorreta. O termociclador realmente controla temperaturas específicas, porém a afirmação de que os ciclos permitem que o DNA seja amplificado apenas uma vez está errada. Na PCR, a amplificação ocorre a cada ciclo, e o número de cópias aumenta aproximadamente como $2^n$ (onde $n$ é o número de ciclos), e não apenas uma única vez.

C) Correta. Em cada ciclo (desnaturação, anelamento e extensão), o DNA é duplicado, resultando em progressão geométrica (exponencial), gerando quantidade detectável.

D) Correta. A etapa de extensão geralmente ocorre em torno de $72\,^{\circ}C$, temperatura ótima para a Taq polimerase, que incorpora os dNTPs e sintetiza as novas fitas complementares.

Alternativa correta: (B).